A sala estéril é geralmente uma pequena sala especialmente criada no laboratório biológico. A área não deve ser muito grande, cerca de 4m2 ~ 5m2, e a altura é de cerca de 2,5m. Um quarto de proteção, uma sala de banho com purificador de ar e um vestiário devem ser fornecidos na sala ao ar livre estéril. Tanto a sala estéril quanto a sala de armazenamento devem ser seladas. O equipamento interno deve ter um filtro de ar. As lâmpadas ultravioleta são instaladas na sala estéril e na sala de armazenamento temporário, e a luz ultravioleta na sala estéril é da superfície de trabalho. O piso e as paredes da sala esterilizada devem ser planos, não devem ser fáceis de esconder e fáceis de limpar. O tampo da mesa de trabalho deve estar nivelado. Os trabalhadores que entram na sala estéril devem usar roupas, bonés e sapatos estéreis no vestiário, passar pelo chuveiro de ar limpo, ir para a sala de armazenamento e entrar na sala estéril para inspeção.
A bancada de trabalho ultralimpa em larga escala é usada em laboratórios gerais em cidades de nível municipal. A bancada de trabalho ultra-limpa tem uma estrutura simples e é fácil de mover. Há lâmpadas roxas e ventiladores purificadores na bancada de trabalho. O exterior é uma pequena porta push-pull ou uma porta de vidro com dois furos. Quando a operação é realizada, os braços podem ser inseridos.
(1) A limpeza da sala de operação asséptica deve atingir 10.000 graus, a temperatura interna deve ser mantida entre 20 ° C e 24 ° C, a umidade deve ser mantida entre 45% e 60% e a limpeza do banco limpo deve ser mantida. alcance 100 graus. O número de colônias deve ser verificado a cada mês na sala estéril. No estado em que a sala estéril ou a bancada limpa é aberta, são retiradas várias placas de Petri estéreis com um diâmetro interno de 90 mm e o ágar de contagem de placas fundido e arrefecido a cerca de 45 ° C é injectado separadamente de forma asséptica. 15 mL do meio foi colocado e solidificado, e depois colocado em uma incubadora a 36 ° C ± 1 ° C por 48 horas. Após a esterilização ser confirmada, foram tomadas 3 a 5 placas, colocadas nas posições esquerda, média e direita da posição de trabalho, e a cobertura foi exposta. Após um minuto, foi colocado em uma incubadora a 36 ° C ± 1 ° C por 48 h e retirado para inspeção. O número médio de bactérias da placa na área limpa de 100 níveis não deve exceder 1 colônia, e a sala limpa média na Classe 10000 não deve exceder 3 colônias. Se o limite for excedido, a sala estéril deve ser completamente desinfetada até que inspeções repetidas sejam satisfatórias.
(2) A sala estéril deve ser mantida limpa e arrumada. Somente as ferramentas de inspeção necessárias, como lâmpadas com álcool, algodão com álcool, isqueiros, pinças, anéis de inoculação, tesouras e canetas de vidro, devem ser armazenadas em ambientes fechados. É estritamente proibido empilhar detritos para evitar a poluição.
(3) A sala estéril deve ser provida de uma concentração de desinfetante de trabalho, tal como solução de cresol a 5%, álcool a 75%, solução de benzalcónio a 0,1% e assim por diante.
(4) Todos os instrumentos, medicamentos, objetos de vidro, etc., que precisam ser levados para a sala estéril, devem ser embalados com firmeza ou esterilizados por métodos apropriados. Por exemplo, a placa de cultura e a palha são esterilizados numa caixa seca a 160 ° C-170 ° C durante 1h ~ 2h e a solução salina fisiológica é esterilizada a 121 ° C durante 20 minutos em autoclave.
(5) A sala estéril deve ser aberta por lâmpada UV na sala estéril e na sala de armazenamento por mais de 30 minutos antes do uso. Ao mesmo tempo, o ventilador purificador é ligado para ventilação. É apenas meia hora depois que a lâmpada UV é desligada para entrar na sala estéril para o trabalho. Depois que a amostra é inspecionada, as amostras restantes e vários remédios e objetos de vidro devem ser limpos a tempo, e todas as lâmpadas UV devem ser ligadas e esterilizadas por 30 minutos.
(6) A amostra a ser inspecionada deve ser mantida intacta antes da inspeção e não deve ser aberta para evitar a poluição. Antes do teste, a superfície externa foi esterilizada com algodão 75% de álcool e esterilizada com algodão alcoólico inflamado, se necessário.
(7) Um controle em branco deve ser executado durante cada operação para verificar a confiabilidade da operação asséptica.
(8) Ao sugar o líquido da bactéria, ele deve ser sugado pela bola de sucção do ouvido. Não toque diretamente no canudo com a boca. Se o canudo tocar a mão e outros objetos não esterilizados, ele deve ser substituído novamente para evitar a poluição.
(9) Antes e depois de cada uso, a agulha de inoculação deve ser esterilizada por combustão com chama, e a cultura pode ser inoculada somente após o resfriamento.
(10) Pipetas, tubos de ensaio, etc. com líquido bacteriano devem ser imersos num balde de desinfecção contendo 5% da solução da solução de sulfato e retirados e lavados em 24 horas; o prato de cultura deve ser reesterilizado na autoclave. Lidar com a base de nutrientes, lembre-se de não correr diretamente para o esgoto para evitar o bloqueio. Se o líquido da bactéria for polvilhado sobre a mesa ou no chão, ele deve ser imediatamente virado na área contaminada por pelo menos 30 minutos com 5% de solução de carbonato de pedra ou 3% da lisina, e depois tratado. Se o revestimento de trabalho estiver contaminado pelo líquido da bactéria, deve ser removido imediatamente, lavar após a autoclavagem.
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