(1) Banco Limpo
A bancada de trabalho limpa é um dispositivo de fluxo laminar parcial, que pode formar um ambiente de trabalho altamente limpo localmente. É composto por uma bancada, um filtro, um ventilador, uma caixa de pressão estática e um corpo de suporte, etc., utilizando ar filtrado para atingir o propósito de purificação e esterilização da área operacional da bancada. O ar interno passa pela área de operação da bancada em um estado de fluxo laminar vertical ou horizontal após o pré-filtro e filtragem de alta eficiência e remoção de poeira. Como o ar não tem turbulência, qualquer poeira ou bactéria presa à poeira pode ser removida e não é fácil espalhar e transferir para outro lugar. Portanto, a área de operação pode ser mantida asséptica.
Comparado com salas estéreis e caixas de inoculação, o uso de bancadas limpas tem as vantagens de boas condições de trabalho, operação conveniente, efeito estéril confiável, nenhum dano ao corpo humano por desinfetantes, pequena área de ocupação e mobilidade. Se for usado em uma sala estéril, o efeito estéril é melhor. A desvantagem é que é caro e o pré-filtro e o filtro de alta eficiência precisam ser limpos e substituídos regularmente.
(2) Pote de esterilização a vapor de alta pressão (Pote de esterilização a vapor de alta pressão)
O esterilizador a vapor de alta pressão é uma panela de metal de camada dupla fechada que pode suportar uma certa pressão. O fundo da panela ou da jaqueta contém água. Quando a água ferve na panela, a pressão na panela aumentará gradualmente porque o vapor não pode escapar, e o ponto de ebulição e a temperatura da água aumentarão proporcionalmente, de modo a atingir o propósito de esterilização em alta temperatura. Geralmente, todos os microorganismos, incluindo esporos, podem ser mortos por esterilização a 121 ℃ por 20 ~ 30min sob pressão de 0,11 MPa. Se o volume do item esterilizado for grande e a penetração do vapor for difícil, a pressão do vapor pode ser adequadamente aumentada ou o tempo de esterilização pode ser prolongado.
Existem muitos tipos de autoclaves, como horizontal, vertical e portátil. Em laboratórios de microbiologia, as autoclaves portáteis e verticais são as mais comumente usadas. Comparado com o pote de esterilização de pressão normal, as vantagens do pote de esterilização de alta pressão são o curto tempo necessário para esterilização, economia de combustível e esterilização completa. A desvantagem é que é caro e a capacidade de esterilização é pequena.
(3) Incubadora (CultureBox)
A incubadora é um equipamento especial para o cultivo de microrganismos. A incubadora tipo aquecimento é um dispositivo de cultura de volume constante e temperatura constante sintetizado por um fio de forno elétrico e um controlador de temperatura, com diferentes tamanhos e especificações. As incubadoras comumente usadas em laboratórios de microbiologia têm um volume de trabalho de 450 × 450 × 350mm3 ou 650 × 500 × 500mm3, o que é adequado para o cultivo de vários microrganismos entre a temperatura ambiente e 60 ° C. Atualmente, com o desenvolvimento do nível científico, a perfeição e o preço dos equipamentos da incubadora são bastante diferentes. Existem várias incubadoras com estrutura razoável e funções completas, como incubadora de temperatura constante, incubadora de temperatura e umidade constantes, incubadora de baixa temperatura, incubadora de microorganismos multiuso e incubadora de dióxido de carbono. Alguns são controlados por um computador, e vários cronogramas podem ser selecionados para alterar a diferença de temperatura, superando assim a influência da temperatura ambiente, e a temperatura necessária para o cultivo pode ser alcançada ao longo do ano.
A incubadora microbiana multiuso é um dispositivo de fermentação de líquido microbiano que integra aquecimento, resfriamento e oscilação. A temperatura da sala de trabalho é selecionada arbitrariamente dentro da faixa de 15 ~ 50 ℃. Após a seleção, ele é controlado automaticamente pelo controlador de temperatura para manter uma temperatura constante na sala de trabalho. Ao mesmo tempo, é equipado com um sistema de controle de velocidade do tiristor e a velocidade do oscilador pode ser ajustada arbitrariamente na faixa de 1 ~ 220 rpm.
(4) Caixa de Secagem
A caixa de secagem é um equipamento usado para remover a umidade ou outras soluções voláteis de materiais úmidos e dentro e fora de recipientes. Existem muitos tipos, incluindo tipo de caixa, tipo de tambor, tipo de conjunto, tipo rotativo e assim por diante. Os laboratórios de microbiologia costumam usar fornos de secagem do tipo caixa com diferentes tamanhos e especificações. A sala de trabalho está equipada com painéis de tela de arame móveis, que são convenientes para colocar os itens secos. O forno de aquecimento e secagem também é composto por um fio de forno elétrico e um controlador de temperatura, e a temperatura pode ser ajustada de temperatura ambiente a 300 ℃ arbitrariamente. Alguns fornos de secagem usam termômetros condutores como componentes sensíveis, combinados com transistores e relés para formar um sistema de controle automático, que supera as deficiências do controle de expansão térmica de tubo de metal. Além disso, existe um forno de secagem a vácuo (equipado com uma bomba de vácuo e um barômetro), que pode funcionar sob pressão normal ou reduzida.
(5) Balanço de cama
O agitador também é chamado de agitador de frasco. É um pequeno dispositivo experimental para o cultivo de microrganismos aeróbios ou utilizado para a expansão de sementes. Os agitadores comumente usados são alternativos e rotativos. A frequência recíproca do agitador recíproco é geralmente 80 ~ 140 vezes / min, e o curso é geralmente 5 ~ 14 cm. Se a frequência for muito rápida, o curso for muito grande ou a quantidade de líquido na garrafa for muito, o líquido irá espirrar para a boca do frasco de curativo ao agitar. Na gaze ou plugues de algodão, causando contaminação por bactérias, o que é mais provável de acontecer durante a inicialização. A excentricidade do agitador rotativo é geralmente entre 3 e 6 cm, e o número de rotações é de 60 a 300 rpm.
O oxigênio necessário para o caldo de fermentação no frasco de cultura (geralmente um frasco triangular) colocado no agitador é passado através da gaze (geralmente 8 camadas) ou tampões envoltos na boca da garrafa, de forma que a transmissão do oxigênio está relacionada ao boca de garrafa. O tamanho, a geometria da boca da garrafa, a espessura e a densidade do tampão ou gaze estão relacionados. Em circunstâncias normais, o coeficiente de absorção de oxigênio do agitador depende das características do agitador e do volume da amostra do frasco.
O agitador alternativo usa o princípio da manivela para fazer com que o agitador retribua. O corpo é uma longa moldura de ferro ou madeira. Existem de uma a três camadas de bandejas. As bandejas têm orifícios redondos para frascos de cultura e um se projeta do orifício. Borracha triangular é usada para fixar a garrafa de cultura e reduzir a vibração da garrafa. O mecanismo de transmissão geralmente adota uma polia secundária para reduzir a velocidade, e a frequência recíproca pode ser alterada mudando a polia de ajuste de velocidade. Existem diferentes orifícios excêntricos na roda excêntrica para ajustar a excentricidade. A frequência e a excentricidade do agitador alternativo têm um efeito significativo na absorção de oxigênio.
O agitador giratório usa um eixo excêntrico giratório para girar a bandeja. A bandeja tem uma ou duas camadas e pode ser feita de placas de aço inoxidável, alumínio ou madeira. Os três eixos excêntricos são equipados com parafusos que podem ser ajustados para cima e para baixo para manter o nível da bandeja. Este tipo de shaker tem uma estrutura complicada e um custo elevado. Suas vantagens são uma melhor transmissão de oxigênio, baixo consumo de energia e o meio de cultura não respinga na gaze na boca da garrafa.
(6) Microscópio
Os microrganismos são muito pequenos e sua morfologia individual e estrutura celular devem ser observadas claramente com a ajuda de um microscópio. Portanto, o microscópio tornou-se uma ferramenta indispensável em vários estudos da microbiologia.
Existem muitos tipos de microscópios. De acordo com sua estrutura, eles podem ser divididos em duas categorias: microscópios ópticos e microscópios não ópticos. O microscópio óptico pode ser dividido em microscópio único e microscópio composto. O microscópio único mais simples é a lupa (a ampliação é geralmente cerca de 10 vezes), e o microscópio único com estrutura complexa é o microscópio de dissecação (a ampliação é de cerca de 200). Na pesquisa de microbiologia, o microscópio composto é usado principalmente. Entre eles, os microscópios ópticos comuns (microscópios de campo claro) são os mais comumente usados. Além disso, existem microscópios de campo escuro, microscópios de contraste de fase, microscópios de fluorescência, microscópios de luz polarizada, microscópios de luz ultravioleta e microscópios invertidos. Os microscópios não ópticos são microscópios eletrônicos.
(7) Caixa Limpa
A caixa de inoculação é dividida em caixa de inoculação de cepa sólida e caixa de inoculação de cepa líquida. A caixa de inoculação de cepas sólidas é uma pequena caixa fechada feita de madeira e vidro ou soldada por acrílico. É dividido em caixas de operação dupla e simples. A caixa pode ser grande ou pequena. Geralmente, a caixa tem cerca de 143 cm de comprimento, 86 cm de largura, 154 cm de altura e suporte de 76 cm. Duas portas de correr de vidro que podem ser abertas e fechadas são instaladas nos lados esquerdo e direito da parte superior da caixa para facilitar a entrada e saída de bactérias. A parte inferior da janela possui dois orifícios redondos com um diâmetro de cerca de 13 cm. A distância central entre os dois orifícios é de 52 cm (mesma largura do ombro). As aberturas são equipadas com mangas com faixas elásticas para evitar que o ar externo entre na caixa quando ambas as mãos estiverem operando na caixa. Causa poluição dentro. Durante a operação, os dois sentam-se frente a frente e suas mãos são estendidas para dentro da caixa através das mangas. É melhor instalar vidro em ambos os lados da caixa e a parte superior da caixa é de madeira ou vidro. Há uma lâmpada germicida ultravioleta e uma lâmpada fluorescente para iluminação na parte superior da caixa. O gabinete pode ser instalado com madeira ou vidro, mas deve ser lacrado.
A caixa de inoculação de cepas líquidas é especialmente projetada para a transferência de cepas líquidas. É mais estreita e mais comprida do que a caixa de sementes sólidas e pode ser operada por duas pessoas de um lado. Há uma trilha e luz ultravioleta dentro. As duas extremidades da caixa possuem saídas retangulares com altura de 25cm e largura de 10cm para facilitar a entrada e saída de bactérias. A entrada está equipada com uma pequena porta de correr. Há uma fonte de vapor sob a entrada e saída, e a entrada e a saída são vedadas com vapor durante a inoculação para evitar que bactérias entrem na caixa. A parte traseira da caixa é fornecida com um pequeno orifício no qual o tubo de transferência de tensão de líquido pode entrar.
Quando a caixa de inoculação é esterilizada, ela é irradiada com luz ultravioleta por 30 minutos. Se não houver lâmpada ultravioleta, use fumigação com formaldeído e permanganato de potássio (formaldeído 10-14mL / m3 + permanganato de potássio 5-7g / m3 espaço) por mais de 30 minutos. Ao usar, coloque primeiro os itens e ferramentas necessários na caixa de inoculação, em seguida, faça a fumigação e a esterilização ultravioleta do medicamento e, em seguida, faça a inoculação de acordo com a operação asséptica. A caixa de inoculação tem estrutura simples, baixo custo, fácil desinfecção e esterilização, operação conveniente, podendo ser operada por pessoas fora da caixa, mesmo em temperaturas altas. A desvantagem é que leva tempo e trabalho para entrar e sair do meio de cultura e precisa ser esterilizado antes de cada inoculação.
(8) Geladeira
Existem dois tipos principais de refrigeradores no laboratório de microbiologia: refrigeradores comuns e refrigeradores congeladores de baixa temperatura. Os refrigeradores comuns geralmente possuem dois armários, a saber, armários de armazenamento e armários frigoríficos, com temperaturas de 4 ° C e -20 ° C respectivamente; a temperatura dos refrigeradores congeladores de baixa temperatura é geralmente controlada entre -40 e -80 ° C. Todos eles podem ser usados para a preservação de cepas microbianas. Armários de armazenamento novos são freqüentemente usados para armazenar cepas inclinadas, e o tempo de preservação é de cerca de 3 meses. Mais de 3 meses, o declive vai secar, por isso é necessário transferir a bactéria. Se você deseja preservar as cepas por muito tempo, é necessário processá-las e armazená-las no freezer de uma geladeira comum ou em um freezer de baixa temperatura. Seu tempo de preservação é maior, geralmente mais de 1 ano.